種屬 |
小鼠 |
別稱 |
pA317 |
組織來(lái)源 |
胚胎 |
疾病 |
轉(zhuǎn)化細(xì)胞系 |
傳代比例/細(xì)胞消化 |
1:2傳代,消化2-3分鐘 |
完全培養(yǎng)基配置 |
DMEM養(yǎng)基;10%胎牛血清;1%雙抗 |
簡(jiǎn)介 |
PA317細(xì)胞源自TK-NIH/3T3細(xì)胞,通過(guò)pBR322中的包裝結(jié)構(gòu)DNA(pPAM3)和pBR322中的單純皰疹病毒胸苷激酶基因共同轉(zhuǎn)染構(gòu)建而成。通過(guò)感染或轉(zhuǎn)染將逆轉(zhuǎn)錄病毒載體導(dǎo)入這些細(xì)胞,結(jié)果生成可以感染許多哺乳動(dòng)物細(xì)胞的雙嗜性載體顆粒。PA317細(xì)胞生成的病毒顆粒已成功地用于將基因?qū)肴祟?,可能因?yàn)橛糜跇?gòu)建PA317細(xì)胞而轉(zhuǎn)入的DNA丟失,能夠包裝逆轉(zhuǎn)錄病毒載體的PA317細(xì)胞百分比隨傳代而減少。在含0.03mM次黃嘌呤、0.001mM氨甲喋呤和0.02mM胸苷的培養(yǎng)基中短暫(大約5天)選擇,可以選出保留了包裝功能的細(xì)胞。選擇后,PA317細(xì)胞應(yīng)在HT培養(yǎng)基(0.03mM次黃嘌呤、0.02mM胸苷)中培養(yǎng)4天,以稀釋殘留的氨甲喋呤,此后PA317細(xì)胞不需選擇可以穩(wěn)定至少1個(gè)月。 |
形態(tài) |
成纖維細(xì)胞樣 |
生長(zhǎng)特征 |
貼壁生長(zhǎng) |
倍增時(shí)間 |
每周 2 至 3 次 |
培養(yǎng)條件 |
氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。 |
凍存條件 |
凍存液:90%FBS,DMSO 10%, 或使用非程序凍存液:官網(wǎng)貨號(hào)JY-H040 |
保藏機(jī)構(gòu) |
ATCC; CRL-9078 |
產(chǎn)品使用 |
僅限于科學(xué)研究,不可作為動(dòng)物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用。 |